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組織消化酶已成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究與臨床轉(zhuǎn)化的核心工具
2025-12-15 組織消化酶是一類能夠特異性降解細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞間連接蛋白的生物催化劑,廣泛用于將實(shí)體組織解離為單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán),是細(xì)胞培養(yǎng)、再生醫(yī)學(xué)與疾病研究重要的“分子剪刀”。憑借組織消化酶溫和、高效、可調(diào)控的特性,已成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究與臨床轉(zhuǎn)化的核心工具。一、原代細(xì)胞分離:在腫瘤、肝臟、神經(jīng)、皮膚等組織研究中,膠原酶能特異性水解膠原蛋白,有效解離致密結(jié)締組織;胰蛋白酶則作用于細(xì)胞表面粘附蛋白,適用于貼壁細(xì)胞傳代;透明質(zhì)酸酶常與膠原酶聯(lián)用,降解糖胺聚糖,提升解離效率。通過(guò)優(yōu)化酶種類、濃度...人胃平滑肌細(xì)胞試劑盒在藥物篩選與機(jī)制研究中的應(yīng)用方案
2025-12-15 人胃平滑肌細(xì)胞試劑盒為藥物篩選與機(jī)制研究提供了高特異性、功能完整的細(xì)胞模型,其應(yīng)用方案需圍繞細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及技術(shù)整合展開,具體如下:一、細(xì)胞模型構(gòu)建與質(zhì)量控制試劑盒內(nèi)含經(jīng)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色驗(yàn)證的純度≥90%的原代人胃平滑肌細(xì)胞,且通過(guò)PCR檢測(cè)排除HIV-1、HBV、HCV及支原體污染。細(xì)胞培養(yǎng)采用含15%FBS的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5%CO?條件下傳代,每2-3天換液,傳代比例1:2,確保細(xì)胞活性>95%。實(shí)驗(yàn)前需通過(guò)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)...經(jīng)典微粒體系列(二)——小鼠肝微粒體(Mouse Liver Microsomes)
2025-12-05 引言歡迎來(lái)到#齊氏生物##經(jīng)典微粒體#系列短文,小鼠肝微粒體(MouseLiverMicrosomes)是體外開展藥物代謝研究的關(guān)鍵工具之一。相較于大鼠肝微粒體在常規(guī)、高效的藥物代謝篩選和機(jī)制研究,小鼠肝微粒體憑借與現(xiàn)代遺傳學(xué)的融合,在闡釋特定基因功能、構(gòu)建人類疾病模型及精準(zhǔn)代謝研究中發(fā)揮著不可替代的作用。一、小鼠肝微粒體(MouseLiverMicrosomes)作為體外藥物代謝研究工具,小鼠肝微粒體富含代謝酶系統(tǒng),主要包含CYP450酶、FMO酶以及UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移...經(jīng)典微粒體系列(一)——大鼠肝微粒體(Rat Liver Microsomes)
2025-12-04 引言歡迎來(lái)到#齊氏生物##經(jīng)典微粒體#系列短文,大鼠肝微粒體(RatLiverMicrosomes)是體外開展藥物代謝研究的關(guān)鍵工具之一。它借助“簡(jiǎn)化”與“聚焦”的方式,搭建了一個(gè)專業(yè)化、高通量、高性價(jià)比且機(jī)制清晰的平臺(tái),專門用于解答藥物代謝研究中有關(guān)“速度”“途徑”和“機(jī)制”的核心問(wèn)題。一、大鼠肝微粒體(RatLiverMicrosomes)作為體外藥物代謝研究工具,大鼠肝微粒體主要包含了肝臟中負(fù)責(zé)藥物I相代謝的關(guān)鍵酶系——細(xì)胞色素P450酶。通過(guò)使用大鼠肝微粒體,研究人員...大鼠肝S9已成為毒理學(xué)及化學(xué)品安全評(píng)估中重要的體外工具
2025-11-24 大鼠肝S9是通過(guò)差速離心從誘導(dǎo)處理的大鼠肝臟中提取的細(xì)胞質(zhì)與微粒體混合物,富含Ⅰ相代謝酶和Ⅱ相結(jié)合酶,能模擬哺乳動(dòng)物體內(nèi)藥物或化學(xué)物的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程。因大鼠肝S9兼具代謝活性與操作便捷性,已成為毒理學(xué)、藥物研發(fā)及化學(xué)品安全評(píng)估中重要的體外工具,在多個(gè)行業(yè)中發(fā)揮著代謝橋梁的核心作用。一、新藥研發(fā)在藥物早期篩選階段,制藥企業(yè)廣泛使用大鼠肝S9進(jìn)行代謝穩(wěn)定性測(cè)試。將候選化合物與S9孵育,通過(guò)LC-MS/MS分析母體藥物降解速率及代謝產(chǎn)物生成情況,快速識(shí)別高清除率或易產(chǎn)生毒性代謝物的分...成纖維抑制劑已經(jīng)在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出價(jià)值
2025-11-17 成纖維抑制劑是一類通過(guò)調(diào)控成纖維細(xì)胞活化、增殖或膠原合成,從而抑制病理性纖維化進(jìn)程的生物活性物質(zhì),包括小分子化合物(如吡非尼酮、尼達(dá)尼布)、單克隆抗體、天然提取物(如姜黃素、積雪草苷)及基因調(diào)控工具。其核心作用在于干預(yù)TGF-β/Smad、Wnt等關(guān)鍵信號(hào)通路,在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出價(jià)值。1、醫(yī)藥與臨床治療在特發(fā)性肺纖維化(IPF)、肝硬化、腎間質(zhì)纖維化及心肌纖維化等疾病中,成纖維抑制劑可顯著延緩病情進(jìn)展。例如,吡非尼酮和尼達(dá)尼布已獲FDA批準(zhǔn)用于IPF治療,通過(guò)抑制成纖維細(xì)胞向肌...豬肝微粒體的規(guī)模化制備、活性鑒定與長(zhǎng)期保存策略
2025-11-17 一、規(guī)模化制備策略組織采集與預(yù)處理選擇健康成年豬,迅速剖取肝臟后立即用預(yù)冷的生理鹽水或勻漿介質(zhì)(如含0.1mmol/LEDTA的0.25mol/L蔗糖-Tris-HCl緩沖液,pH7.4)沖洗,去除殘留血液和結(jié)締組織。肝臟剪碎后按1:3-1:5(w/v)比例加入緩沖液,使用勻漿器在低溫下勻漿至無(wú)可見顆粒,制成肝勻漿。差速離心分離將勻漿液在4℃條件下進(jìn)行梯度離心:第一步離心:600-1000g離心5-10分鐘,去除細(xì)胞核、線粒體等沉淀,收集上清液。第二步離心:將上清液于10,0...
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